基于變性泡介導的鏈交換擴增技術(shù)(Strand Exchange Amplification, SEA)是我公司自主知識產(chǎn)權的新一代等溫核酸檢測技術(shù),具有簡(jiǎn)單、快捷、經(jīng)濟、高特異性、高靈敏度,高擴展性等特點(diǎn),在醫療健康、食品安全、檢驗檢疫、環(huán)境監測、動(dòng)物疫病等領(lǐng)域具有廣闊的應用前景。
單核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一種常見(jiàn)的土壤細菌,在土壤中它是一種腐生菌,以死亡的和正在腐爛的有機物為食。它也是某些食物(主要是鮮奶產(chǎn)品)中的一種污染物,能引起嚴重食物中毒。單核細胞增生李斯特氏菌是一種人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李氏特菌病,感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎和單核細胞增多,嚴重威脅人類(lèi)的健康,因此單增李斯特菌在食品中的檢測尤為重要。
應用SEA技術(shù)以單增李斯特菌為研究對象,本團隊開(kāi)發(fā)了檢測單增的核酸快速檢測試劑盒,并將研究結果發(fā)表在A(yíng)nal,Biochem.2018, 545: 38-42 ,結果表明具有產(chǎn)品較高的特異性和靈敏度,重復性好,可以商品化使用。
1. 特異性和抗干擾能力
A: SEA方法的特異性。1-6分別表示的是:以單核細胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157:H7的增菌液為基礎,稀釋1000倍后為擴增靶標;7表示NTC。
B: SEA方法的抗干擾能力。1ˊ 表示靶標為稀釋1000倍的單核細胞增生李斯特菌的增菌液;2ˊ 表示靶標為增菌液的混合物,即單核細胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌和大腸桿菌O157:H7的增菌液稀釋1000倍后,按1:1:1:1:1:1的比例混合。3ˊ 表示NTC。
2. 檢測限和重復性
A: 不同濃度的單核細胞增生李斯特菌基因組DNA的實(shí)時(shí)熒光曲線(xiàn)。1-5分別表示為1.0 ×10^(-10) M至1.0 ×^(-14 ) M,稀釋10倍,6表示NTC。
B: Tt值與基因組DNA靶標量(CLM)的負對數值之間的關(guān)系。誤差棒顯示三次測定的平均標準偏差。
C: 使用PAGE電泳觀(guān)察相應的SEA反應產(chǎn)物。
除此之外,我公司在食品安全領(lǐng)域其他致病菌,如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157:H7、副溶血性弧菌、蠟樣芽胞桿菌等均有系列核酸檢測試劑盒,產(chǎn)品在多省市食藥監局盲樣抽檢中表現優(yōu)異,已和國內知名食品企業(yè)簽訂戰略合作協(xié)議,獲得良好的客戶(hù)反應度,歡迎廣大客戶(hù)及經(jīng)銷(xiāo)商采購。
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